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酶免技術常應用的酶有過氧化物酶和堿性磷酸酶，針對不同的酶，所作用的底物是不同的。過氧化物酶，通常來源于辣根，因此稱為辣根過氧化物酶（Horseradish Peroxidase, HRP）。HRP具有分子量小、標記方法簡單、性質穩定等優點，是臨床檢驗試劑中一種常用的酶，被廣泛用于生化檢測項目及免疫類（ELISA）試劑盒。
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HRP發色底物
辣根過氧化物酶發色底物為過氧化物和供氫體（DH2），其真正底物是H2O2，人們往往習慣把供氫體稱為底物或統稱供氫體底物。在ELISA中常用的供氫體有以下幾種：
1、OPD是ELISA技術中應用較多的供氫體，酶作用后顯黃色（最大吸收波長為492 nm），靈敏度高，測定方便。
2、TMB是近年來常用的一種供氫底物，經酶作用后顯天藍色，目測對比度鮮明，加酸終止酶反應后變黃色（最大吸收波長為450 nm），易比色定量測定。
3、DAB供氫底物，其反應產物為不能溶解的棕色吩嗪衍生物，可用不同光鏡觀察。此種多聚物還能被還原和螯合四氯化碳，形成具有電子密度的產物，便于用電鏡觀察。
o-Phenylenediamine, OPD, 99.5%
鄰苯二胺
反應產物：黃色、可溶
100g，500g
3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine, TMB, 99%
3,3',5,5'-四甲基聯苯胺
反應產物：藍色（黃色）、可溶
1g, 5g
3,3'-Diaminobenzidine, DAB, 99%
3,3'-二氨基聯苯胺
反應產物：棕色、不溶
25g, 100g
Benzidine, 95%
聯苯胺
反應產物：藍色、不溶
25g, 250g
5-Aminosalicylic acid, 98.5%
5-氨基水楊酸
反應產物：棕色、可溶
25g, 100g, 500g
Azinobis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid-2NH4-salt, 98%
2,2'-二氮-雙(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)銨鹽
反應產物：綠色、可溶
1g
3-Amino-9-ethylcarbazole, 95%
3-氨基-9-乙基咔唑
反應產物：紅色、可溶
5g, 25g
Chloro-1-naphthol, 97.5%
4-氯-1萘酚
反應產物：藍色、可溶
25g
HRP的發光底物
魯米諾（3-氨基鄰苯二甲酰肼, Luminol）或其衍生物如異魯米諾（4-氨基鄰苯二甲酰肼，Isoluminol），是一類重要的發光試劑。用HRP標記抗體，進行免疫反應后，利用魯米諾作為發光底物，在HRP和起動發光試劑（NaOH + H2O2）作用下，魯米諾發光，發光強度依賴于酶免疫反應物中酶的濃度。反應過程如下圖所示：
Luminol, 98%
魯米諾
1g, 5g, 25g
Isoluminol, 98%
異魯米諾
1g, 10g
4-Iodophenol, 99%
4-碘苯酚
5g, 25g, 100g
Sodium tetraphenylborate, 99.5%(ACS)
四苯基硼酸鈉
25g, 100g, 500g
Bovine serum albumin [Fraction V], BSA
牛血清白蛋白
5g, 25g, 100g
Dodecyl sulfate sodium salt, SDS, 99%
十二烷基硫酸鈉
100g, 500g
Sodium deoxycholate, 98%
去氧膽酸鈉
25g, 100g, 500g
Phenylmethylsulfonyl fluoride, PMSF, 99%
苯甲基磺酰氟化物
25g, 100g
Leupeptin, 96.5%
亮抑酶肽
5mg, 25mg, 100mg
Tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride, Tris-HCl, 99%
三（羥甲基）氨基甲烷鹽酸鹽
5g, 25g, 100g, 500g
Polysorbate 80
吐溫 80
25ml, 250mL, 1L
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